核糖核酸酶A(RNase A)CAS:9001-99-4
中文名称 核糖核酸酶A
中文别名 核糖核酸酶I;RNA酶
英文名称 Ribonuclease A from bovine pancreas
英文别名 RNase I;RNase A
CAS登录号 9001-99-4
酶活力 ≥60u/mg
外观与性状 白色冻干粉末。
安全等级 S22-24/25
储存条件 易吸潮,-20℃储存。
产品用途 生化研究,测定核酸的结构:RNase 保护检测;去除非特异结合的RNA;分析RNA 序列;水解蛋白样品中的RNA;纯化DNA。
此外,它具有显著的细胞毒性,可以杀灭许多肿瘤细胞系,可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制,可以治疗乙肝。
1.从DNA-RNA或RNA—RNA杂合体中去除未杂合的RNA区。
2.确定DNA或RNA中单碱基突变的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。 在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA杂合体上的单碱基错配可被RNA酶A识别并切割。利用含SP5或T7噬菌体启动子的质粒,在体外合成与野生型DNA或RNA互补的32p标记RNA探针,然后与待检含单碱基置换的DNA或RNA退火, 所产生的单碱基错配可用RNA酶A切割,通过凝胶电泳分析切割产物的大小即可确定错配的位置。在所有各种可能的单碱基错配中,大约50%可用此法确定。
应用领域 1.从 DNA:RNA 杂交体中去除未杂交的 RNA 区;
2.确定 RNA 或 DNA 中的单碱基突变的位置。在 RNA:DNA 或 RNA:RNA 杂交体中,若存在单碱基错,可用 RNAseA 识别并切割。通过凝胶电泳分析切割产物的大小,即可确定错配的位嚣;
3.RNA 检测。RNA 酶保护分析法是近年来发展起来的一种检测 RNA 的杂交技术;
4.降解DNA制备物中的RNA分子。
核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶,可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3'端,切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3'磷酸及末端带嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。无辅因子及二价阳离子存在时,核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂(B1ackburn et al.1977)或氧钒—核糖核苷复合物(Puskas et al.1982)所抑制。